马齿苋提取液体外抑菌作用的实验研究

amy54321 · 发表于 2014-8-19 18:13:31

【摘要】  目的观察马齿苋提取液体外抗菌实验效果。方法用临床分离的志贺菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌为受试菌。采用几何级稀释法测定马齿苋提取液的体外最低抑菌浓度（MIC）。结果马齿苋对志贺菌、大肠埃希菌抑菌效果较强，MIC范围分别为7.81～0.97 g·L-1和31.25～1.95 g·L-1，MIC50和MIC90分别为3.90，7.81 g·L-1和7.81,31.25 g·L-1；对金黄色葡萄球菌和肠球菌抑菌效果较弱，MIC范围均在125.00～3.90 g·L-1之间，MIC50和MIC90均为31.25和62.50 g·L-1。结论马齿苋对志贺菌和大肠埃希菌具有较强的抑菌效果。

【关键词】  马齿苋黄酮类物质抑菌作用病原菌

　　马齿苋Portulace oleracea L.是马齿苋科植物，别名：瓜子菜、长命菜、爬地苋、马齿菜等，是全年生草本植物，我国大部分地区有分布，都是可食用的野菜。《本草纲目》中早就有这方面的记载，李时珍曰：“马齿苋处处有之，田野有生……人多采苗煮晒为蔬”。马齿苋可治疗泄泻等病证。本实验研究马齿苋提取液的抗菌作用，旨在为临床应用提供理论依据。

　　1  材料与方法

　　1.1  材料

　　1.1.1  供试菌种与培养基实验选用G+菌：金黄色葡萄球菌和肠球菌，G-菌：志贺菌和大肠埃希菌，各20株。菌株均来源于临床病人体内分离所获得。培养基均采用普通营养琼脂。普通营养琼脂培养基、营养肉汤均购自杭州微生物试剂有限公司产品。

　　1.1.2  马齿苋提取液的制备马齿苋购于临海市医药公司。准确称取烘干马齿苋100 g，粉碎后用沸水、70%乙醇和60%丙酮提取，反复多次进行直至浸出液颜色变淡为止。接着将浸出液除去乙醇和丙酮并浓缩至80 ml，用NaOH调节pH至7.0～7.2，使沉淀物完全溶解，离心（4 000 r/min）15～20 min，取上清液，并定容至100 ml，即每毫升提取液为1 g马齿苋粉末的提取液。

　　1.2  方法

　　1.2.1  菌液制备将冰箱保存的供试菌种接种于营养肉汤培养基中，经37℃培养18～24 h，然后用预温无菌的营养肉汤培养基制成浓度为109/ml。

　　1.2.2  马齿苋的最低抑菌浓度（MIC）测定参照周氏［1］法，采用几何级稀释法。操作在净化工作台内进行。先取加塞无菌小试管12支，在第2、3管分别加入备用马齿苋提取液0.5 ml；在第3～11管分别加入营养肉汤0.5 ml；用微量加样器从第3管开始倍比稀释备用马齿苋提取液至第11管；第1管加营养肉汤1.5 ml，第2～11管各加1.0 ml，第12管加2.0 ml；第1～11管各加相应待测菌液0.5 ml；第1管为阳性对照管，第12管为阴性对照管。药液浓度从第2管开始依次为250.0，125.00，62.50，31.25，15.62，7.81，3.90，1.95，0.97，0.48 g/L，共10个稀释度，充分混匀，放置37℃培养18～24 h。由于中药液本身的浑浊，细菌生长后使得肉眼无法观察结果，分别从每一管中取两接种环接种在营养琼脂平板上，37℃培养18～24 h，观察细菌生长情况，记录马齿苋对细菌的MIC，并计算MIC50及MIC90的药物浓度［2］。

　　1.2.3  结果判断目前国内外尚无统一中草药对细菌的MIC标准，笔者参照同类实验［3］的标准作为判断标准，即MIC＜7.81 g/L生药浓度时为较高敏感，当MIC在7.81～250.00 g/L时为中度敏感，当MIC＞250.00 g/L生药浓度时为不敏感。　2  结果

　　2.1  抑菌活性马齿苋对供试菌体外作用有一定的差异。其对志贺菌、大肠埃希菌的抑菌效果较强，对金黄色葡萄球菌、肠球菌的抑菌效果较弱。结果见表1。

　　表1  马齿苋对4种病原菌的抑菌效果（略）

　　2.2  最低抑菌浓度（MIC）的测定根据抑菌活性实验结果，4种病原菌对马齿苋的MIC结果见表2。

　　表2  4种病原菌对马齿苋的MIC值（略）

　　3  讨论

　　马齿苋资源丰富，是药用食用俱佳的野生植物。它既含有多种营养成分，又含有较高的黄酮类化合物［4］。黄酮类化合物是药用植物的一大类有效成分，具有多种生物活性，其主要作用之一是抑菌或杀菌，低浓度时能抑菌，高浓度时能杀菌，马齿苋成分中还含有左旋去甲肾上腺素，多巴明及少量多巴，以及维生素A样物质、维生素B1、维生素B2、PP、维生素C、皂苷、鞣质、胡萝卜素、树脂、脂肪、氨基酸、多种有机物，全草并显生物碱、香豆精、蒽醌类化合物［5］，这些生物活性成分对提高人体免疫力，防治心脏病、高血压病、糖尿病、癌症等疾病具有特殊医疗保健作用。本实验结果表明：马齿苋对选用的G菌（志贺菌、大肠埃希菌）具有较强的抑菌作用，而对G+菌（金黄色葡萄球菌、肠球菌）作用效果明显减弱，其机制有待进一步深入研究。

【参考文献】
  　　［1］周邦清.常用中药的抗菌作用及其测定方法［M］.重庆：科技文献出版社重庆分社，1987：46.

　　［2］徐叔云，卞如濂，陈修，等.药理学实验方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2003：1665.

　　［3］刘忠仪，张国威，何云志.解脲支原体中药药敏试验［J］.中华皮肤科杂志，1996，29（5）：349.

　　［4］朱丹，牛广财，孙希云，等.马齿苋黄酮类物质抑菌作用的研究［J］.安徽农业科学，2006，34（1）：7.

　　［5］福建省中医研究所.福建药物志，第1册［M］.福州：福建科技出版社，1982：474.

		自动登录	找回密码
密码			立即注册

[药学] 马齿苋提取液体外抑菌作用的实验研究