黔产管花党参中党参炔苷的含量测定

amy54321 · 发表于 2014-8-18 13:45:00

【摘要】  目的测定黔产管花党参中党参炔苷的含量，为管花党参的质量控制及引种栽培等提供科学依据。方法采用高效液相色谱（HPLC）法分析，色谱柱依利特-ODS2（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-水（20∶80）为流动相，检测波长为270 nm。结果测定了5个产地的管花党参中党参炔苷的含量，含量范围为1.265～4.093 mg·g-1。结论该方法快速简便，重现性好，可用于管花党参的质量评价。

【关键词】  管花党参；党参炔苷；高效液相色谱法

　　Determination of Lobetyolin in Radix Codonopsis Tubulosae of Guizhou

　　Abstract:ObjectiveDetermination of lobetyolin in Radix Codonopsis Tubulosae of Guizhou was carried on to control the quality,introduction and cultivation,etc.MethodsHypersil ODS2（250 mm×4.6 mm,5 μm）was used with acetonitrile-water(20∶80) as the mobile phase and DAD detection was at 270 nm.ResultsRadix Codonopsis Tubulosae of 5 habitat in Guizhou were analyzed.The content of lobetyolin ranged from 1.265～4.093 mg·g-1.ConclusionThe method appeared to be simple, quick and reproducible. It can be used to control the quality of Radix Codonopsis Tubulosae.

　　Key words:Radix Codonopsis Tubulosae;  Lobetyolin; HPLC

　　管花党参Codonopsis tubulosa Kom.为桔梗科党参属植物，分布于贵州西北部及云南、四川等地。其干燥根入药又名“贵州党参”“叙党”“甜党”等，为《贵州省中药材、民族药材质量标准》2003年版收载品种［1］。其根入药具有补中益气、健脾益肺等功能，用于脾胃虚弱，气短心悸，食少便溏，虚喘咳嗽、内热消渴等症。在贵州及一些地区，管花党参亦作党参入药使用。由于以往党参的质量控制方法尚无统一规范，从而影响了党参的有效利用。2005年版《中国药典》新增加了以党参炔苷为特征性成分薄层鉴别党参［2］。另有文献［3］报道党参炔苷为党参保护胃黏膜的活性成分之一，并可采用HPLC法进行含量测定。通过文献检索，未见应用HPLC法测定管花党参中党参炔苷的相关报道。因此,为了考察黔产管花党参的质量，我们分别测定了贵州5个产地的管花党参中党参炔苷的含量，以期为管花党参的品质评价及引种栽培等提供有价值的参考。

　　1  仪器、试剂与试药

　　1.1  仪器Agilent 1100高效液相色谱仪；DAD检测器；CSF1B超声波清洗仪（上海超声波仪器厂）；AG135型电子天平（瑞士Mettler-Toledo公司）。

　　1.2  试剂党参炔苷（lobetyolin）对照品（购于江西本草天工科技有限责任公司，纯度＞98%）；乙腈为色谱纯；甲醇为分析纯；水为重蒸水。

　　1.3  供试药材所有供试药材均由作者亲自到产地进行采挖，并由贵阳中医学院何顺志教授鉴定，采回后洗净，晒干。药材来源见表1。

　　2  方法与结果

　　2.1  检测波长的选择取适量党参炔苷对照品，加入甲醇配制成一定浓度的对照品溶液，进样，用DAD检测器在190～400 nm进行检测。党参炔苷在270 nm处具有最大吸收值，因此选择270 nm作为检测波长。

　　表1  黔产管花党参中党参炔苷的含量（略）

　　2.2  色谱条件色谱柱为依利特ODS2（250 mm×4.6 mm,5 μm）；流动相为乙腈-水（20∶80）；流速1 ml·min-1；检测波长270 nm；柱温25℃；进样量10 μl。

　　2.3  溶液的制备

　　2.3.1  对照品溶液的制备取党参炔苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每毫升含党参炔苷0.1 mg的对照品溶液，即得。

　　2.3.2  供试品溶液的制备

　　提取条件的确定：以甲醇为溶剂，分别采用水浴回流提取、超声提取、索氏提取、冷浸过夜等提取方法进行比较。结果表明，以甲醇超声提取和水浴回流提取最为完全，但两种提取方法并无显著差异，故选择超声提取，并对超声提取时间进行考察。结果为超声提取60 min与120 min无明显差异，因此选择超声提取60 min。　　供试品溶液的制备：取供试药材粉末1 g（过3号筛），精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 ml,称定重量，超声提取60 min，放冷，加甲醇补足减失重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25 ml，置蒸发皿中，水浴蒸干，以甲醇溶解并定量转移至5 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液，即得。
　　2.4 线性关系考察取党参炔苷对照品约12 mg，精密称定，置10 ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取该溶液适量，分别制成618，247.2，98.88，39.55，15.82，6.33，2.53 μg·ml-1。将上述对照品溶液分别进样，进样量10 μl，测定峰面积。以对照品质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得回归方程为Y=9.370 07X＋7.206 03，r=0.999 99，党参炔苷在0.0253～6.18 μg间与峰面积呈良好线性关系。

　　2.5 精密度实验取浓度为247.2μg·ml-1的对照品溶液，连续进样6次，进样量10 μl，测定。以党参炔苷峰面积为考察指标，RSD为0.48%，表明精密度良好。

　　2.6  稳定性实验取1号供试药材粉末1 g，精密称定，按“2.3.2”项下的方法制备，得供试品溶液，室温放置，分别在0，2，4，8，16，24，48 h进样测定，以党参炔苷吸收峰面积为考察指标，RSD为0.61%，表明供试液中的党参炔苷在48h内基本稳定。

　　2.7 重现性实验取1号供试药材粉末6份，各1 g，精密称定，按“2.3.2”项下的方法制备，依法测定，计算样品含量，RSD为2.45%，表明重现性良好。

　　2.8 加样回收率实验取1号供试药材粉末6份，各1 g，精密称定，分别加入一定量的党参炔苷对照品，按“2.3.2”项下的方法制备，依法检测，计算回收率，结果平均回收率为98.36%，RSD为0.61%。

　　2.9  样品测定按“2.3.2”项下的方法制备供试品和对照品溶液，对采集的9个管花党参药材样品中的党参炔苷进行含量测定，结果见图1及表1。

　　3  讨论

　　据文献检索，应用HPLC对管花党参中党参炔苷的含量进行测定尚属首次。实验结果表明所测管花党参根中党参炔苷的含量范围为1.265～4.093 mg·g-1，远高于《中国药典》收载的3个品种〔党参Codonopsis pilosula (Franch.)Nannf.，川党参C.tangshen Oliv.及素花党参C.pilosula var.modesta (Nannf.)L.T.Shen〕中党参炔苷的含量0.035～1.314 mg·g-1 ［2］。另据报道党参炔苷对乙醇造成的胃黏膜损伤有很好的保护作用，是党参保护胃黏膜的活性成分之一［2］，表明管花党参在治疗胃溃疡等疾病方面具有较高的研究价值。

　　图1  党参炔苷（a）管花党参根（b）管花党参茎叶（c）HPLC色谱图（略）

　　实验结果表明管花党参中党参炔苷的含量与产地有关，威宁所产最高，其次为清镇所产，分别达到4.093和3.071 mg·g-1。除此，党参炔苷的含量可能随采收期变化而变化，但具体影响程度有待于进一步研究。

　　通过对2个产地的管花党参茎叶中党参炔苷的含量进行测定，结果显示所测茎叶中党参炔苷的含量范围为1.237～1.904 mg·g-1，说明茎叶同样可以入药使用，这不仅能缓解党参资源的紧缺，而且可以带来一定经济效益和社会效益。

【参考文献】
  　　［1］贵州省药品监督管理局.贵州省中药材民族药材质量标准（2003年版）［S］.贵阳：贵州科技出版社，2003：280.

　　［2］国家药典委员会.中国药典［S］.北京：化学工业出版社，2005：199.

　　［3］贺庆，朱恩圆，王峥涛，等.党参中党参炔苷HPLC分析［J］.中国药学杂志，2005，40（1）：56.

		自动登录	找回密码
密码			立即注册

[药学] 黔产管花党参中党参炔苷的含量测定