广藿香挥发油止咳化痰药理实验的研究

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【摘要】  目的研究广藿香挥发油的止咳、化痰作用。方法采用小鼠氨水引咳法观察止咳作用；用小鼠酚红排泌法观察化痰作用。结果广藿香挥发油能明显延长引起半数小鼠咳嗽的氨水喷雾时间（EDT50），能促进小鼠气管酚红的排泌。结论 广藿香挥发油具有明显止咳、化痰作用。　

【关键词】  广藿香； 止咳； 化痰

　　Experimental Studies on Antitussive，Expectorant and Antiasthmatic Effects of the Extract from Pogostemon cablin(Blanco) Benth.

　　Abstract:ObjectiveTo observe the antitussive and expectorant effects of the extract from Pogostemon cablin(Blanco) Benth. Methods The model of cough induced by ammonia liquor spray in mice was used to observe the antitussive effect; the model of phenel red execretion in mice was used to observe the expectorant effect. ResultsThe extract from Pogostem on cablin(Blanco) Benth. could inhibit the cough induced by ammonia in mice and increase phenol red output of trachea in mice. ConclusionThe extract from Pogostemon cablin(Blanco) Benth. has a significant antitussive and expectorant effects.

　　Key wordsogostemon cablin(Blanco) Benth.;  Antitussive；  Expectorant
   
　　广藿香Pogostemon cablin(Blanco) Benth.为唇形科刺蕊草属植物, 原产东南亚等国, 引种我国后, 主产于广东,全草药用。其味辛, 微温, 归脾、胃、肺三经, 具有芳香化浊、开胃止呕、发表解暑的功能［1］，是消化系统疾患及暑湿时令之常用中药。药理作用主要表现在抑菌、抗螺旋体、促进消化功能, 缓解胃肠损害, 抑制呼吸道病原体等方面。广藿香的药理研究主要集中在抗菌［2］、消化道功能和胃肠平滑肌解痉作用［3］。目前尚未见有关广藿香的止咳、化痰药理方面的研究报道。笔者对广藿香挥发油进行止咳、化痰作用的动物实验研究。实验结果如下。

　　1  材料

　　1.1  药物及试剂  广藿香药材购自广州清平市场。广藿香挥发油制备：取广藿香地上部分，晾干剪碎后，精密称取碎叶置于蒸馏瓶中，加入一定量的蒸馏水，按2005版《中国药典》附录XD法（甲法）对挥发油进行提取，出油率为1.32%；美沙芬片：广州光华药业股份有限公司，批号：T25008；桂龙咳喘宁胶囊：山西桂龙医药有限公司生产，批号：060321。

　　1.2  动物  昆明种小鼠，雄性，体重18～22g，SPF级，由中国人民解放军第一军医大学实验动物中心提供，动物合格证号：2006A033。

　　1.3  设备  恒压喷雾装置由空压机将浓氨水通过喷雾器雾化喷入动物容器内，引起咳嗽，气压为1.13个大气压，实验前先调试本装置。

　　2  方法

　　2.1   对浓氨水致咳小鼠的影响［4］　取昆明种小鼠50只，随机分为5组，即正常对照组、广藿香挥发油低剂量组、广藿香挥发油中剂量组、广藿香挥发油高剂量组、阳性对照药物（美沙芬）组，每组10只，实验前小鼠禁食不禁水12 h，然后各组小鼠按0.3 ml/20 g体重灌胃给药，其中正常对照组给等体积蒸馏水。给药后1 h，小鼠接受喷雾，按一定时间喷入浓氨水气雾，结束，立即取出小鼠，观察有无咳嗽反应。观察1 min内咳嗽次数，若1 min内出现3次以上典型咳嗽动作（腹肌收缩或缩胸，同时张大嘴，有时可有咳声）者，算作“有咳嗽”;否则算作“无咳嗽”。以停止接触氨水刺激后1 min内咳嗽次数大于或等于3次判为阳性，个别动物在实验中出现死亡或休克，判为咳嗽阳性。用序贯法（上下法）求出引起半数小鼠咳嗽的喷雾时间（EDT50）。计算R值，若R值大于130%，说明药物有止咳作用。若R值大于150%，则表明有显著的止咳作用。　　EDT50=log-1c/n〔式中n为动物数，c为rx值的总和，r为每剂量组的动物数，x为剂量（即喷雾时间）的对数〕
   
　　R(%)＝（给药组的EDT50/模型组的EDT50）×100%
　　2.2  对小鼠气管酚红排泌量的影响［5］标准酚红曲线的绘制：用分析天平准确称取一定量的酚红，用5%碳酸氢钠溶解，配成每毫升含12.5 ng，然后顺次进行倍比稀释成每毫升含酚红6.25，3.125，1.562 5，0.781 3，0.390 6，0.195 3，0.097 7，0.048 8 ng，用分光光度计测OD值。以酚红浓度为纵坐标，OD值为横坐标，根据酚红浓度和OD值计算出回归方程。根据回归方程计算出小鼠气管酚红的排泌量。
   
　　取昆明种小鼠50只，随机分为5组，即正常对照组、广藿香挥发油低剂量组、广藿香挥发油中剂量组、广藿香挥发油高剂量组、阳性对照药物（桂龙咳喘宁胶囊）组，每组10只，实验前小鼠禁食不禁水12 h，然后各组小鼠按0.3 ml/20 g体重灌胃给药，其中模型对照组给等体积蒸馏水。给药后30min，腹腔注射5%酚红生理盐水溶液0.2 ml/20 g，注射后30 min，处死小鼠，剪取气管，将各气管段放入预先盛有1.5 ml的5% NaHCO3溶液试管中，超声波清洗，使气管段中的酚红完全释放，溶液于分光光度计546 nm处测OD值，24 h后重测OD值，根据回归方程计算出酚红的含量，根据酚红含量和动物体重计算出校正酚红含量，计算化痰率。
   
　　酚红含量＝OD值×7.623 8－0.055 5，校正酚红含量＝酚红含量（ng）/小鼠体重（kg）；
   
　　化痰率（%）＝（给药组的校正酚红含量/模型组的校正酚红含量）×100%

　　2.3  统计学处理　实验数据以“均数±标准差”表示，采用SPSS11.5统计软件进行统计学处理。

　　3  结果

　　3.1  广藿香提取物对浓氨水致咳小鼠的影响由表1可见，广藿香挥发油中、高剂量组的R值均＞130%，说明广藿香挥发油具有良好的止咳作用。

　　表1  广藿香提取物对浓氨水致咳小鼠的影响（略）

　　3.2  广藿香提取物对小鼠气管酚红排泌量的影响由表2可见，广藿香挥发油和水提物低、中、高剂量组均有良好的化痰作用。

　　表2  广藿香提取物对小鼠气管酚红排泌量的影响（略）

　　与模型对照组比较，*P＜0.05， **P＜0.01；n=10

　　4  讨论
   
　　为研究广藿香的药用价值，我们以广藿香进行提取，得到挥发油，为探讨该提取物的药理作用，我们对其进行了浓氨水致咳小鼠、小鼠气管酚红排泌量的实验研究，结果表明，广藿香挥发油具有止咳、化痰的作用，为广藿香的化学成分研究，提供了指导意义。　

【参考文献】
  　　［1］ 国家药典委员会. 中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：30.

　　［2］ Osawa K, Matsumoto T, Maruyama T, et al. Studies of the antibacterial activity of plant extracts and their constituents against periodontopathic bacteria［J］.Bull Tokyo Dent Coll , 1990 , 31 (1) ：17.

　　［3］ Ichikawa K, Kinoshita T , Sankawa U. The screening of Chinese crude drugs for Ca2+ antagonist activity ; identification of active principles from the aerial part of Pogostemon cablin and the fruits of Prunus mume［J］.Chem Pharm Bull Tokyo , 1989 , 37 (2)：345.

　　［4］ 陈 奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2000：101.

　　［5］ 罗霄山，许家骝，张诚光，等.咳喘乐颗粒镇咳、祛痰、平喘作用的实验研究［J］.中药材，2004，27（7）：520.