参黄口服液中人参皂苷Rg1的含量测定

amy54321 · 发表于 2014-8-17 22:36:50

【摘要】  目的用高效液相色谱（HPLC）法测定参黄口服液中人参皂苷Rg1的含量。方法色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶,流动相为乙腈 0.05%磷酸。结果人参皂苷Rg1在0.251～ 2.15 μg之间呈良好的线性关系；制剂中人参皂苷Rg1的平均回收率为98.73 % (RSD=2.7 % ) 。结论该方法简便、准确、分离效果好 ,无干扰 ,可用于参黄口服液的质量评价。

【关键词】  参黄口服液; 人参皂苷Rg1；高效液相色谱

　　　　Abstract：ObjectiveTo establish the quantitative method of ginsenoside Rg1 in Shenhuang Oral Liquid by HPLC. MethodsThe column was packed with 5 μm Diamonsil C18 stationary phase. The mobile phase consisted of acetonitrile-water.ResultsThe linear range  was 0.251～ 2.15 μg.The average recovery was 98.73%(RSD was 2.7%).ConclusionThe method was convenient and accurate. It can te used as a method of quality evaluation for Shenhuang Oral Liquid.

　　Key words：Shenhuang Oral;  Ginsenoside Rg1；  HPLC

　　参黄口服液是以人参、黄芪、柴胡等8味药材制成的中药复方制剂，系中药6类新药，具有健脾益气、解郁提神的功效。方中人参为主药，本实验以高效液相色谱法对参黄口服液中人参皂苷Rg1进行含量测定研究。

　　1  仪器与试剂

　　仪器：高效液相色谱仪：日本岛津公司（LC-2010A）,乙腈为色谱纯，Dikma 公司。对照品人参皂苷Rg1（批号0703－200118），为中国药品生物制品检定所提供。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；Dikma（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流动相为乙腈0.05%磷酸（20∶80）；检测波长203 nm。

　　2.2  对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品适量，加甲醇制成每毫升含人参皂苷Rg1 0.2 mg的溶液，即得。

　　2.3  供试品溶液制备　精密量取本品10 ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取3次，10 ml/次，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，10 ml/次，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，10 ml/次，取正丁醇液蒸干，残渣加1%氢氧化钠溶液2 ml使溶解，置已处理好的D101大孔吸附树脂柱（直径1 cm，长10 cm）上，用1%氢氧化钠溶液50 ml洗脱，再用水50 ml洗脱，继用40%甲醇50 ml洗脱，最后用80%甲醇80 ml洗脱，收集80%甲醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

　　分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，得到参黄口服液的色谱分离图。见图1。

　　2.4  精密度实验取人参皂苷Rg1对照品溶液，按样品测定法测定，共进样5次，结果RSD＝0.7%。结果表明，本法的精密度良好。　2.5  线性关系考察精密称取人参皂苷Rg1对照品10.75 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，再精密吸取对照品溶液1.0，2.5，5.0，7.5，10.0 ml分别置于10 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，分别精密量取上述对照品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，以进样量为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为y=2E+06x+3 724,r=1。

　　结果表明，人参皂苷Rg1在0.251～ 2.15 μg范围内呈良好的线性关系。

　　a对照品       b参黄口服液样品

　　图1  参黄口服液HPLC图（略）

　　2.6  稳定性实验　取样品供试溶液，每隔1 h测定1次，共测定6 h，结果6次测定的含量均值为0.428 ml/支，RSD为0.8%。

　　2.7  重复性实验取同一批样品，按含量测定方法测定6次。6次测定的RSD＝0.9%，结果表明，本法的重复性良好。

　　2.8  回收率实验［1］分别精密最取已知含量的同一批供试品6份，每份5 ml，分别精密加入对照品溶液各1 ml ，按样品项下方法进行测定，结果平均回收率为98.73%，RSD＝2.7%。结果见表1。

　　2.9  专属性取相当于处方量1/10药材，按【制法】制成缺人参的阴性样品。取样品，对照品及阴性样品按含量测定方法实验，结果在与对照品相同保留时间未见色谱，本法的专属性好。色谱图如图2。

　　表1  回收率实验结果（略）

　　2.10  样品测定结果取3批供试品按含量测定方法进行实验，3批样品的含量分别为：0.422，0.432，0.425 mg/支。

　　按以上含量测定方法进行回收率实验表明，含量测定方法的回收率较好，采用的方法精密度高；稳定性实验表明，样品供试溶液的稳定性较好；重复性实验表明，重复性较好；线性实验表明，在0.251～2.51μg 浓度范围内浓度和峰面积线性关系好；专属性实验表明，阴性样品无干扰，该方法的专属性好。

　　图2  阴性样品色谱图（略）
　　
　　3  讨论

　　实验中采用大孔吸附树脂柱对样品进行处理，可使人参中有效成分得到良好的提取，同时，流动相中加入少量磷酸，可使其中的皂苷类成分得到有效分离。

【参考文献】
  　　［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：附录115.

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[药学] 参黄口服液中人参皂苷Rg1的含量测定